B. halodurans C-125 ve Geobacillus sp. TF16 ksilanaz genleri kullanılarak DNA shuffling yöntemini temel alan bir yaklaşımla kimerik ksilanaz genleri oluşturuldu. Bu kimerik genler; GeoInH2CTer, GeoInH2CTer2, GeoIntraH2Int3 ve GeoIntraH2Int4 olarak isimlendirildi. Kimerik genler pET28a(+) ekspresyon vektörüne aktarılarak, E. coli BL21 (DE3) suşu içerisinde çoğaltıldı. Aktarım sonucunda GeoIntraH2Int3 ve GeoIntraH2Int4’de ekspresyon görülürken, GeoInH2CTer, GeoInH2CTer2‘de ekspresyona rastlanmadı. GeoIntraH2Int3’ün optimum sıcaklığı 60 °C, pH’sı 8,0, GeoIntraH2Int4’ün optimum sıcaklığı 50-60 °C, optimum pH’sı ise 8,0-10,0 olarak bulundu
|
